Elettroforesi RNA
La verifica dell’integrità dell’RNA è uno step essenziale nelle analisi di espressione genica nelle moderne tecniche di ibridazione su microarrays di cDNA, ma anche in quelle più tradizionali come la RT-PCR. L’elettroforesi su gel automatizzata con chips microfluidici permette una caratterizzazione del campione non solo veloce e affidabile, ma anche indipendente dal singolo esperimento, dall’operatore e dal laboratorio in cui venga effettuata la prova. Infatti non si deve far altro che dosare nel chip i campioni (fino ad un massimo di 12) e i reagenti e far partire l’analisi, il tutto seguendo una metodica precisa già ottimizzata.
Il software con l’esclusiva funzione di valutazione “RIN “(RNA Integrity Number), dà una misura accurata e riproducibile dello stato del campione e si configura così come il primo strumento automatico di standardizzazione dell’RNA, in grado di assegnare un valore confrontabile anche tra laboratori siti a centinaia di chilometri di distanza.L’assenza di RNasi in reagenti, chips e accessori evita la degrazione del campione durante l’analisi.
Quantità di mRNA e RNA totale anche di soli 200pg, vengono determinate da campioni di solo 1 µL
Oltre al citato QC di RNA totale, altre applicazioni finora sviluppate includono l’analisi di RNA da campionamenti per laser microdissection, l’analisi di RNA marcato con sonde fluorescenti (come ad esempio Cy5), la determinazione della presenza di contaminazioni di RNA ribosomale o di DNA.
Scoprite di più sulle applicazioni di elettroforesi RNA, sul sito Agilent Technologies
Specifiche
| Agilent RNA 6000 Nano kit | Agilent RNA 6000 Pico kit | |||
| Specifiche Analitiche | Total RNA | mRNA | Total RNA | mRNA |
| Range Quantitativo | 25÷500 ng/µL | 25÷250 ng/µL | — | — |
| Range Qualitativo | 5÷500 ng/µL | 25÷250 ng/µL | 50÷5.000 pg/µL (in acqua) | 250÷5.000 pg/µL (in acqua) |
| Sensibilità (S/N > 3) | 5 pg/µL in acqua | 250 pg/µL in acqua | 50
pg/µL in acqua, 200 pg/µL in TE |
250 pg/µL
in acqua, 500 pg/µL in TE |
| Riproducibilità quantitativa | 10 % CV (all’interno del chip) | 10 % CV (all’interno del chip) | 20 % CV (all’interno del chip) | 20 % CV (all’interno del chip) |
| Accuratezza* | 20 % CV | 20 % CV | 30 % CV | 30 % CV |
| Compatibilità tamponi | 100mM
Tris, 0,1mM EDTA o 125mM NaCl o 15mM MgCl2 |
100mM Tris, 0,1mM
EDTA o 125mM NaCl o 15mM MgCl2 |
50mM
Tris, 0,1mM EDTA o 50mM NaCl o 15mM MgCl2 |
50mM Tris, 0,1mM
EDTA o 50mM NaCl o 15mM MgCl2 |
| Specifiche Fisiche | ||||
| Tempo di analisi | 30 minuti | 30 minuti | 30 minuti | 30 minuti |
| Quantità di campione | 1 µL | 1 µL | 1 µL | 1 µL |
| Numero di campioni | 12/chip | 12/chip | 11/chip | 11/chip |
| Stabilità chips | Più di 4 mesi se conservati in maniera appropriata | |||
Per ordinare
| Codice Prodotto | Descrizione | |
| 5067-1511 | RNA 6000 Nano Kit | Kit per analisi e quantificazione di campioni di RNA totale o messaggero, include 25 chips (da 12 campioni l’uno), 2 chips pulitura, siringa, reagenti, accessori e la guida ai reagenti |
| 5067-1514 | RNA 6000 Pico Kit | Kit ad alta risoluzione per analisi di campioni di RNA totale o messaggero, include 25 chips (da 12 campioni l’uno), 2 chips pulitura, siringa, reagenti, accessori e la guida ai reagenti |
| 5067-1513 | RNA 6000 Pico Reagents | Include i soli reagenti, ladder e marker |
| 5067-1535 | Ladder per Agilent RNA 6000 Pico | |
| 5067-1512 | RNA 6000 Nano Reagents | Include i soli reagenti, ladder e marker |
| 5067-1529 | Ladder per Agilent RNA 6000 Nano | |
